Calculadora de biología y laboratorio de MAXScanner
Calculadora de número de copias de ADN: ng/µL, pb, copias/µL y copias para qPCR
Convierta la concentración másica de ADN de doble o simple cadena y la longitud del fragmento en moléculas por microlitro, moléculas totales y copias de molde de qPCR por reacción. El peso molecular exacto opcional sustituye la estimación por pares de bases.
Resultados
Fórmula, ejemplo y suposiciones
MW≈longitud×660 g/mol para ADN de doble cadena o ×330 g/mol para ADN de simple cadena; copias/µL=(ng/µL×10⁻⁹/MW)×Nₐ; copias/reacción=copias/µL×µL de molde.
Un amplicón de ADN de doble cadena de 150 pb a 10 ng/µL contiene unas 6,08×10¹⁰ moléculas/µL; añadir 2 µL aporta unas 1,22×10¹¹ moléculas de molde.
- Los valores de 660 y 330 g/mol por base son aproximaciones medias para planificación; use un peso molecular exacto del proveedor cuando esté disponible.
- El número de copias es una conversión a número de moléculas, no una predicción de la eficiencia de amplificación de qPCR ni del Ct/Cq medido.
Preguntas frecuentes
¿El ADN plasmídico circular usa una fórmula de peso molecular diferente?
La topología no cambia de forma significativa la conversión de masa por pares de bases. Use la longitud completa del plásmido y el peso molecular del ADN de doble cadena, salvo que disponga de un peso molecular exacto.
¿Cómo se obtienen las copias por reacción de qPCR?
Calcule las copias por microlitro a partir de la concentración y la longitud del fragmento, y después multiplique por el volumen de molde añadido a una reacción.