MAXScanner 생물·실험실 계산기
PCR 어닐링 온도 계산기 — 프라이머 쌍, ΔTm 및 그라디언트 범위
정방향·역방향 프라이머의 Tm 값으로 실용적인 PCR 어닐링 온도의 출발점을 추정하고, 짝이 맞지 않는 프라이머 쌍을 표시하며, 실험적 최적화를 위한 그라디언트 온도 범위를 생성합니다.
최종 업데이트: 2026-09-17
결과
두 프라이머의 Tm 값을 모두 0 °C보다 높게 입력하세요
공식, 예시 및 가정
시작 Ta≈낮은 프라이머 Tm−5 °C; 그라디언트는 시작 추정값을 중심으로 표시됩니다.
Tm이 60 °C와 61 °C인 프라이머의 경우, 시작 어닐링 온도를 55 °C로 추정하고 주변 그라디언트를 함께 설정하면 유용한 첫 실험이 됩니다.
- 어닐링 온도는 프로토콜과 DNA 중합효소에 따라 달라지며, 제조사 지침이 우선합니다.
- 결과는 실험적 최적화를 위한 출발점일 뿐, 증폭 특이성이나 수율을 보장하지 않습니다.
자주 묻는 질문
왜 낮은 프라이머 Tm을 기준으로 하나요?
공통 어닐링 단계에서는 두 프라이머가 모두 결합할 수 있어야 합니다. 따라서 간단한 시작 규칙은 열적으로 덜 안정한 프라이머에 맞춥니다.
프라이머 Tm 값의 차이가 크면 어떻게 하나요?
ΔTm이 크면 설계상의 경고 신호입니다. 억지로 절충 온도를 정하기보다는 프라이머 쌍을 다시 설계하고 실험으로 검증하는 것을 고려하세요.