Calculadora de biología y laboratorio de MAXScanner
Calculadora de ligación de ADN: relación molar inserto:vector, ng, fmol y volúmenes de pipeteo
Calcule la masa de ADN de inserto necesaria a partir de las longitudes del vector y del inserto, compare la relación molar real inserto:vector, convierta ambos fragmentos a femtomoles y, opcionalmente, calcule los volúmenes de pipeteo a partir de las concentraciones de las soluciones madre.
Resultados
Fórmula, ejemplo y suposiciones
ng de inserto objetivo=ng de vector×(pb inserto/pb vector)×relación objetivo; fmol de ADN de doble cadena=ng×10⁶/(pb×660).
Con 50 ng de un vector de 3.000 pb y un inserto de 1.000 pb, una relación molar objetivo de 3:1 requiere 50 ng de inserto.
- La ecuación de relación másica supone que ambos fragmentos son ADN de doble cadena.
- Una relación molar útil depende de la química de ensamblaje, el tipo de extremos, el diseño de los fragmentos y el protocolo; la calculadora muestra el cálculo aritmético y no prescribe una condición de laboratorio.
Preguntas frecuentes
¿Por qué usar una relación molar en lugar de masas iguales de ADN?
La ligación une moléculas. A igual masa, los fragmentos cortos contienen más moléculas que los largos, por lo que hay que incluir la longitud del fragmento.
¿Puede esta calculadora calcular volúmenes de pipeteo?
Sí. Introduzca las concentraciones de las soluciones madre de vector e inserto para convertir las cantidades calculadas en nanogramos a microlitros.