Calcolatore di biologia e laboratorio MAXScanner
Calcolatore del numero di copie di DNA — ng/µL, bp, copie/µL e copie qPCR
Converte la concentrazione in massa di DNA a doppio o singolo filamento e la lunghezza del frammento in molecole per microlitro, numero totale di molecole e copie di templato qPCR per reazione. Il peso molecolare esatto, se indicato, sostituisce la stima basata sulle coppie di basi.
Risultati
Formula, esempio e ipotesi
MW≈lunghezza×660 g/mol per dsDNA o ×330 g/mol per ssDNA; copie/µL=(ng/µL×10⁻⁹/MW)×Nₐ; copie/reazione=copie/µL×µL di templato.
Un ampliconе dsDNA di 150 bp a 10 ng/µL contiene circa 6,08×10¹⁰ molecole/µL; aggiungendo 2 µL si apportano circa 1,22×10¹¹ molecole di templato.
- I valori 660 e 330 g/mol per base sono approssimazioni medie per la pianificazione; usa il peso molecolare esatto fornito dal produttore quando disponibile.
- Il numero di copie è una conversione del conteggio di molecole, non una previsione dell'efficienza di amplificazione qPCR né dei valori Ct/Cq misurati.
Domande frequenti
Il DNA plasmidico circolare usa una formula diversa per il peso molecolare?
La topologia non cambia in modo sostanziale la conversione della massa per coppia di basi. Usa la lunghezza completa del plasmide e il peso molecolare del dsDNA, a meno che tu non disponga di un peso molecolare esatto.
Come si calcolano le copie per reazione qPCR?
Calcola le copie per microlitro a partire dalla concentrazione e dalla lunghezza del frammento, poi moltiplica per il volume di templato aggiunto a una singola reazione.