Calcolatore di biologia e laboratorio MAXScanner
Calcolatore di concentrazione del DNA — A260, rapporti di purezza, ng/µL e nM
Converte l'assorbanza A260 in concentrazione di dsDNA, ssDNA o RNA con correzione per diluizione e cammino ottico, verifica i rapporti di purezza A260/A280 e A260/A230 e converte ng/µL di DNA in nM quando è nota la lunghezza del frammento.
Risultati
Formula, esempio e ipotesi
Concentrazione(ng/µL)=A260×fattore×diluizione/cammino ottico; fattori: dsDNA 50, RNA 40, ssDNA 33. dsDNA nM=(ng/µL×10⁶)/(bp×660).
Un A260=0,5 per dsDNA non diluito con cammino ottico normalizzato di 1 cm dà 25 ng/µL.
- I fattori standard di A260 sono approssimazioni e presuppongono un bianco appropriato e una misura di assorbanza corretta.
- I rapporti di purezza sono indicatori di screening, non una prova che il campione sia adatto a un saggio a valle.
Domande frequenti
Perché ng/µL e µg/mL hanno lo stesso valore numerico?
Un nanogrammo per microlitro equivale a un microgrammo per millilitro, perché numeratore e denominatore cambiano entrambi di un fattore 1.000.
Cosa mi indica il rapporto A260/A280?
È comunemente usato come indicatore rapido della purezza degli acidi nucleici. Va interpretato secondo le indicazioni dello strumento e il contesto del campione, e non come un risultato di superamento o non superamento preso da solo.