Calculadora de biologia e laboratório MAXScanner
Calculadora de Tm de Primers — Temperatura de Fusão, GC% e Verificação de Par de Primers
Estime a temperatura de fusão (Tm) de primers de DNA a partir da sequência, compare primers forward e reverse, analise o conteúdo de GC e o ΔTm e veja o método de cálculo utilizado.
Última atualização: 2026-09-17
Resultados
Fórmula, exemplo e premissas
Oligos curtos: Tm≈2(A+T)+4(G+C). Oligos longos: Tm≈64,9+41·(GC−16,4)/N.
Um primer de 20 bases com conteúdo de GC equilibrado normalmente fica próximo da faixa de temperatura usada como ponto de partida para a otimização rotineira de PCR.
- Esta é uma estimativa de planejamento com fins educacionais; a química do tampão e os sistemas de polimerase podem alterar a Tm experimental.
- Para trabalhos em que a sequência é crítica, compare com uma calculadora de vizinho mais próximo, usando suas concentrações reais de íons e de oligos.
Perguntas frequentes
Por que as calculadoras de Tm de primers apresentam resultados diferentes?
Elas podem usar modelos termodinâmicos diferentes, correções de sal, concentrações de oligos e premissas de tampão distintas. Compare o método e as condições, e não apenas o valor final.
A cauda de clonagem em 5' deve ser incluída?
Para o pareamento inicial do primeiro ciclo, avalie separadamente a região de ligação ao molde, pois uma cauda que não anela não se pareia com o molde no início.