MAXScanner生物学与实验室计算器
qPCR效率计算器——标准曲线、斜率、R²与残差
根据斜率计算qPCR扩增效率,或拟合完整的Ct/Cq与模板量标准曲线。获取斜率、截距、R²、效率、扩增倍数以及逐点残差。
拟合您的标准曲线
每个标准品一行:模板量、Ct/Cq。量可以是拷贝数、浓度或相对量,但必须保持在同一个一致的量纲下。
斜率
-3.3000扩增效率
100.9%R²
1.0000扩增倍数
2.009×截距
35.0000斜率 → 效率快速求解
扩增效率
100.0%
每循环扩增倍数
2.000×
公式:E% = (10^(-1/斜率) - 1) × 100。质量阈值仅作为检测场景下的参考指引,不能替代您的实验方案或验证标准。
逐点残差分析
| 模板量 | log₁₀ 模板量 | 实测 Ct/Cq | 预测值 | 残差 |
|---|---|---|---|---|
| 1000000 | 6.0000 | 15.2 | 15.200 | -0.000 |
| 100000 | 5.0000 | 18.5 | 18.500 | 0.000 |
| 10000 | 4.0000 | 21.8 | 21.800 | 0.000 |
| 1000 | 3.0000 | 25.1 | 25.100 | 0.000 |
| 100 | 2.0000 | 28.4 | 28.400 | 0.000 |
本标准曲线计算器的工作原理
为每个标准品粘贴模板量及实测Ct/Cq值。计算器会对每个正的模板量取log₁₀,用普通最小二乘法拟合直线,再由斜率推算扩增效率。与仅显示斜率的小工具不同,它会同时显示R²、截距、预测Ct/Cq值以及每个残差,方便你检查曲线本身,而不是只看一个百分比结果。
实用工作流程
如需设计标准品,可先使用梯度稀释计算器;需要时,将DNA浓度换算为分子拷贝数,然后在此粘贴实测的标准品系列数据。所有模板量请保持单位一致。
常见问题
如何根据斜率计算qPCR效率?
效率 = (10^(-1/斜率) − 1) × 100%。斜率约为 -3.322 时,对应的扩增效率约为 100%。
能否根据我的梯度稀释系列计算斜率和R²?
可以。请至少粘贴三组模板量与Ct/Cq数据对。计算器会对正的模板量取以10为底的对数,再用普通最小二乘法拟合Ct/Cq与log10(模板量)的关系。
为什么要显示残差?
残差表示每个实测Ct/Cq值与拟合标准曲线之间的偏差大小。它能帮助你快速发现异常的稀释点,同时不会将其隐藏。