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MAXScanner生物学与实验室计算器

qPCR效率计算器——标准曲线、斜率、R²与残差

根据斜率计算qPCR扩增效率,或拟合完整的Ct/Cq与模板量标准曲线。获取斜率、截距、R²、效率、扩增倍数以及逐点残差。

拟合您的标准曲线

每个标准品一行:模板量、Ct/Cq。量可以是拷贝数、浓度或相对量,但必须保持在同一个一致的量纲下。

斜率
-3.3000
扩增效率
100.9%
R²
1.0000
扩增倍数
2.009×
截距
35.0000

斜率 → 效率快速求解

扩增效率
100.0%
每循环扩增倍数
2.000×

公式:E% = (10^(-1/斜率) - 1) × 100。质量阈值仅作为检测场景下的参考指引,不能替代您的实验方案或验证标准。

逐点残差分析

模板量log₁₀ 模板量实测 Ct/Cq预测值残差
10000006.000015.215.200-0.000
1000005.000018.518.5000.000
100004.000021.821.8000.000
10003.000025.125.1000.000
1002.000028.428.4000.000

本标准曲线计算器的工作原理

为每个标准品粘贴模板量及实测Ct/Cq值。计算器会对每个正的模板量取log₁₀,用普通最小二乘法拟合直线,再由斜率推算扩增效率。与仅显示斜率的小工具不同,它会同时显示R²、截距、预测Ct/Cq值以及每个残差,方便你检查曲线本身,而不是只看一个百分比结果。

实用工作流程

如需设计标准品,可先使用梯度稀释计算器;需要时,将DNA浓度换算为分子拷贝数,然后在此粘贴实测的标准品系列数据。所有模板量请保持单位一致。

常见问题

如何根据斜率计算qPCR效率?

效率 = (10^(-1/斜率) − 1) × 100%。斜率约为 -3.322 时,对应的扩增效率约为 100%。

能否根据我的梯度稀释系列计算斜率和R²?

可以。请至少粘贴三组模板量与Ct/Cq数据对。计算器会对正的模板量取以10为底的对数,再用普通最小二乘法拟合Ct/Cq与log10(模板量)的关系。

为什么要显示残差?

残差表示每个实测Ct/Cq值与拟合标准曲线之间的偏差大小。它能帮助你快速发现异常的稀释点,同时不会将其隐藏。

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