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qPCR-Effizienzrechner — Standardkurve, Steigung, R² & Residuen

Berechnen Sie die qPCR-Amplifikationseffizienz aus einer Steigung oder passen Sie eine vollständige Ct/Cq-gegen-Template-Standardkurve an. Erhalten Sie Steigung, Achsenabschnitt, R², Effizienz, Amplifikationsfaktor und punktweise Residuen.

Standardkurve anpassen

Eine Zeile pro Standard: Vorlagenmenge, Ct/Cq. Die Menge kann Kopienzahl, Konzentration oder relative Menge sein, muss aber durchgehend auf derselben Skala liegen.

Steigung
-3,3000
Effizienz
100,9%
R²
1,0000
Amplifikation
2,009×
Achsenabschnitt
35,0000

Schnelle Berechnung: Steigung → Effizienz

Effizienz
100,0%
Amplifikationsfaktor / Zyklus
2,000×

Formel: E% = (10^(-1/Steigung) − 1) × 100. Die Qualitätsgrenzwerte dienen als Orientierung im jeweiligen Testkontext und ersetzen weder Ihr Protokoll noch Ihre Validierungskriterien.

Punktweise Residuenanalyse

Mengelog₁₀ MengeGemessener Ct/CqVorhergesagtResiduum
10000006,000015,215,200-0,000
1000005,000018,518,5000,000
100004,000021,821,8000,000
10003,000025,125,1000,000
1002,000028,428,4000,000

So funktioniert dieser Standardkurven-Rechner

Fügen Sie für jeden Standard die Template-Menge und den gemessenen Ct/Cq-Wert ein. Der Rechner bildet den Logarithmus log₁₀ jeder positiven Template-Menge, passt eine Ausgleichsgerade nach der Methode der kleinsten Quadrate an und leitet daraus die Amplifikationseffizienz ab. Anders als ein reines Steigungs-Tool zeigt er R², Achsenabschnitt, vorhergesagte Ct/Cq-Werte und alle Residuen an, sodass Sie die Kurve prüfen können, statt einem einzigen Prozentwert zu vertrauen.

Sinnvoller Arbeitsablauf

Planen Sie Standards mit dem Rechner für serielle Verdünnungen, rechnen Sie bei Bedarf die DNA-Konzentration in Molekülkopien um und fügen Sie anschließend die gemessene Standardreihe hier ein. Achten Sie darauf, dass alle Template-Mengen einheitliche Einheiten haben.

Häufige Fragen

Wie wird die qPCR-Effizienz aus der Steigung berechnet?

Die Effizienz ergibt sich aus (10^(-1/Steigung)-1)×100 %. Eine Steigung nahe -3,322 entspricht etwa 100 % Amplifikationseffizienz.

Kann ich Steigung und R² aus meiner Verdünnungsreihe berechnen?

Ja. Fügen Sie mindestens drei Paare aus Template-Menge und Ct/Cq-Wert ein. Der Rechner logarithmiert die positiven Template-Mengen zu log10 und passt Ct/Cq gegen log10(Template) mittels Methode der kleinsten Quadrate an.

Warum werden Residuen angezeigt?

Residuen zeigen, wie weit jeder gemessene Ct/Cq-Wert von der angepassten Standardkurve abweicht. So fällt ein ungewöhnlicher Verdünnungspunkt leichter auf, ohne dass er verborgen wird.

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