Calculateur de biologie et de laboratoire MAXScanner
Calculateur de ligature d'ADN — Ratio molaire insert:vecteur, ng, fmol et volumes de pipetage
Calculez la masse d'ADN d'insert nécessaire à partir des longueurs du vecteur et de l'insert, comparez le ratio molaire insert:vecteur réel, convertissez les deux fragments en femtomoles et, si vous le souhaitez, calculez les volumes de pipetage à partir des concentrations des solutions mères.
Résultats
Formule, exemple et hypothèses
ng d'insert cible=ng de vecteur×(pb insert/pb vecteur)×ratio cible ; fmol ADN double brin=ng×10⁶/(pb×660).
Avec 50 ng d'un vecteur de 3 000 pb et un insert de 1 000 pb, un ratio molaire cible de 3:1 nécessite 50 ng d'insert.
- L'équation du ratio massique suppose que les deux fragments sont de l'ADN double brin.
- Un ratio molaire utile dépend de la chimie d'assemblage, du type d'extrémités, de la conception des fragments et du protocole ; le calculateur fournit un calcul arithmétique et ne prescrit pas de condition de laboratoire.
Questions fréquentes
Pourquoi utiliser un ratio molaire plutôt qu'une masse d'ADN égale ?
La ligature assemble des molécules. À masse égale, les fragments courts contiennent plus de molécules que les longs ; la longueur des fragments doit donc être prise en compte.
Ce calculateur peut-il calculer des volumes de pipetage ?
Oui. Saisissez les concentrations des solutions mères du vecteur et de l'insert pour convertir les quantités calculées en nanogrammes en microlitres.