Calculadora de biologia e laboratório MAXScanner
Calculadora de Concentração de DNA — A260, Razões de Pureza, ng/µL e nM
Converta a absorbância em A260 para concentração de DNA de fita dupla, DNA de fita simples ou RNA, com correção de diluição e de caminho óptico; avalie as razões de pureza A260/A280 e A260/A230 e converta ng/µL de DNA em nM quando o comprimento do fragmento for conhecido.
Resultados
Fórmula, exemplo e premissas
Concentração(ng/µL)=A260×fator×diluição/caminho óptico; fatores: DNA de fita dupla 50, RNA 40, DNA de fita simples 33. DNA de fita dupla nM=(ng/µL×10⁶)/(pb×660).
A260=0,5 para DNA de fita dupla sem diluição, em caminho normalizado de 1 cm, resulta em 25 ng/µL.
- Os fatores padrão de A260 são aproximações e pressupõem um branco adequado e uma medição de absorbância apropriada.
- Os índices de pureza são indicadores de triagem, não prova de que uma amostra é adequada para um ensaio posterior.
Perguntas frequentes
Por que ng/µL e µg/mL têm valores numéricos iguais?
Um nanograma por microlitro equivale a um micrograma por mililitro porque o numerador e o denominador são ambos multiplicados por 1.000.
O que a razão A260/A280 indica?
Ela é comumente usada como indicador rápido de pureza de ácidos nucleicos. Interprete-a com base nas orientações do seu equipamento e no contexto da amostra, e não como resultado de aprovado/reprovado por si só.