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MAXScanner 生物與實驗室計算機

qPCR 效率計算機 — 標準曲線、斜率、R² 與殘差

由斜率計算 qPCR 擴增效率,或依 Ct/Cq 與模板量擬合完整標準曲線。可得到斜率、截距、R²、效率、擴增倍數及逐點殘差。

擬合您的標準曲線

每個標準品佔一列:模板量、Ct/Cq。模板量可為拷貝數、濃度或相對量,但必須維持同一種一致的尺度。

斜率
-3.3000
效率
100.9%
R²
1.0000
擴增倍率
2.009×
截距
35.0000

斜率 → 效率快速換算

效率
100.0%
每循環擴增倍率
2.000×

公式:E% = (10^(-1/斜率) - 1) × 100。品質門檻僅供檢測情境參考,不能取代您的實驗流程或驗證標準。

逐點殘差檢核

模板量log₁₀ 模板量實測 Ct/Cq預測值殘差
10000006.000015.215.200-0.000
1000005.000018.518.5000.000
100004.000021.821.8000.000
10003.000025.125.1000.000
1002.000028.428.4000.000

標準曲線計算機的運作方式

請為每個標準品貼上模板量與實測 Ct/Cq。計算機會對每個正的模板量取 log₁₀,以普通最小平方法擬合直線,再由斜率推導擴增效率。與僅顯示斜率的工具不同,本計算機同時呈現 R²、截距、預測 Ct/Cq 及每個殘差,讓您能檢視曲線本身,而非僅憑單一百分比數值做判斷。

實用流程

需要時可先用連續稀釋計算機規劃標準品,將 DNA 濃度換算為分子拷貝數,再將實測標準品數列貼到此處。請確保所有模板量的單位一致。

常見問題

如何由斜率計算 qPCR 效率?

效率 = (10^(-1/斜率)-1)×100%。斜率接近 -3.322 時,對應約 100% 的擴增效率。

可以用稀釋系列計算斜率與 R² 嗎?

可以。請至少貼上三組模板量與 Ct/Cq 數據。計算機會對正的模板量取 log10 轉換,並以普通最小平方法將 Ct/Cq 對 log10(模板量) 進行擬合。

為什麼要顯示殘差?

殘差顯示每個實測 Ct/Cq 與擬合標準曲線的偏差程度,讓異常的稀釋點更容易被發現,同時不會隱藏該數據。

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